Matapos ang tagumpay sa Jerico, humarap ang mga Israelita sa lungsod ng Ai na may labis na tiwala. Pinabayaan nila ang kanilang kalaban at nagpadala lamang ng maliit na pwersa na humigit-kumulang tatlong libong tao. Sa kabila ng kanilang tiwala, sila ay natalo at napilitang umatras. Ang insidenteng ito ay nagpapakita ng kahalagahan ng pagpapakumbaba at pagtitiwala sa Diyos sa halip na umasa lamang sa sariling lakas o mga nakaraang tagumpay. Ang pagkatalo sa Ai ay nagsisilbing aral na ang tagumpay sa mga espiritwal na laban ay nangangailangan ng higit pa sa bilang o estratehiya; kinakailangan ang pagsunod sa kalooban ng Diyos at ang pagsunod sa Kanyang mga utos.
Ang pagkatalo ng mga Israelita sa Ai ay hindi lamang isang pagkatalo sa militar kundi isang espiritwal na gising. Ipinakita nito ang mga nakatagong isyu ng pagsuway at kasalanan sa kanilang kampo na kailangang ayusin. Ang kwentong ito ay naghihikbi sa mga mananampalataya na suriin ang kanilang sariling buhay para sa mga aspeto kung saan maaari silang umasa nang labis sa kanilang sariling pag-unawa o mga nakaraang tagumpay, sa halip na humingi ng gabay at lakas mula sa Diyos. Isang makapangyarihang paalala na ang tunay na tagumpay ay nagmumula sa Diyos, at ang espiritwal na paghahanda ay mahalaga upang malampasan ang mga hamon.