Sa panalangin na ito, inihahayag ni Jesus ang kanyang pagnanais na maranasan ng kanyang mga tagasunod ang isang pagkakaisa na sumasalamin sa malapit na relasyon na mayroon siya sa Ama. Ang pagkakaisang ito ay hindi lamang tungkol sa pagkakasundo o pagkakaroon ng magkatulad na paniniwala; ito ay tungkol sa isang malalim na espiritwal na pagkakaisa na sumasalamin sa pagkakaisa sa loob ng Santatlo. Binibigyang-diin ng panalangin ni Jesus ang kahalagahan ng mga mananampalataya na maging nagkakaisa sa layunin at pagmamahal, dahil ang pagkakaisang ito ay nagsisilbing makapangyarihang saksi sa mundo. Kapag ang mga Kristiyano ay nagkakaisa, ipinapakita nito ang katotohanan ng misyon ni Jesus at ang realidad ng pag-ibig ng Diyos sa mga nakamasid sa kanilang buhay.
Ang pagkakaisang tinutukoy ni Jesus ay dapat lumampas sa mga pagkakaiba at dibisyon, na lumilikha ng isang komunidad na sumasalamin sa pag-ibig at pagkakaisa ng Diyos. Ang pagkakaisang ito ay isang patotoo sa mundo, na nagpapakita na si Jesus ay tunay na isinugo ng Ama. Tinatawag nito ang mga mananampalataya na mamuhay sa paraang sumasalamin sa banal na relasyon, na nagtataguyod ng isang kapaligiran kung saan nangingibabaw ang pagmamahal at pag-unawa. Ang ganitong pagkakaisa ay hindi lamang kapaki-pakinabang para sa komunidad ng mga mananampalataya kundi nagsisilbing paanyaya sa iba na maranasan ang pag-ibig at katotohanan ng Ebanghelyo.